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| Untersuchte Arbeit: Seite: 40, Zeilen: 1 ss. (página entera) |
Quelle: Cervello 2009 Seite(n): 59, 60, Zeilen: 59: 9 ss.; 60: 1 ss. |
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| - Marcadores del potencial de membrana: son las cianinas y la rodamina 123. También marcan mitocondrias debido a la alta diferencia de potencial entre su membrana.
- Marcadores de membrana y lípidos, marcadores que diferencian compartimentos con distinto pH: poco usados en citometría de flujo. Realización de citometría de flujo. Se hace en 3 etapas independientes: • Fase pre-citometría: preparación de los reactivos, preparación de las células, diseño del protocolo y coloración de las células con los reactivos fluorescentes. • Fase de citometría de flujo: involucra el procesamiento de las células marcadas y la recolección de los datos para cada una de las medidas (parámetros) realizados en cada célula individual. • Fase de análisis: análisis de los datos recolectados. La mezcla de células teñidas con diferentes fluorocromos es forzada a pasar a través de una aguja creando una delgada fila de líquido que contiene las células. A medida que cada célula pasa en frente del láser, desvía el rayo incidente y las moléculas teñidas unidas a la célula van a ser excitadas y emiten luz fluorescente. Tubos fotomultiplicadores detectan tanto la luz desviada y las emisiones fluorescentes, la información es digitalizada y procesada por el ordenador. Los resultados son presentados a manera de histogramas o "dot-plots". Ventajas de la citometría de flujo. Las ventajas de esta técnica son las siguientes: • Análisis y cuantificación de un número estadísticamente significativo de células (desde 1.000 a más de 100.000 células). • Múltiples marcajes de una sola célula. |
- Marcadores del potencial de membrana: son las cianinas y la rodamina 123. También marcan mitocondrias debido a la alta diferencia de potencial entre su membrana.
- Marcadores de membrana y lípidos, marcadores que diferencian compartimentos con distinto pH: poco usados en citometría de flujo. Realización de citometría de flujo. Se hace en 3 etapas independientes: • Fase pre-citometría: preparación de los reactivos, preparación de las células, diseño del protocolo y coloración de las células con los reactivos fluorescentes. • Fase de citometría de flujo: involucra el procesamiento de las células marcadas y la recolección de los datos para cada una de las medidas (parámetros) realizados en cada célula individual. • Fase de análisis: análisis de los datos recolectados. La mezcla de células teñidas con diferentes fluorocromos es forzada a pasar a través de una aguja creando una delgada fila de líquido que contiene las células. A medida que cada célula pasa en frente del láser, desvía el rayo incidente y las moléculas teñidas unidas a la célula van a ser excitadas y emiten luz fluorescente. Tubos fotomultiplicadores detectan tanto la luz desviada y las emisiones fluorescentes, la información es digitalizada y procesada por el ordenador. Los resultados son presentados a manera de histogramas o "dot-plots". [página 60] Ventajas de la citometría de flujo. Las ventajas de esta técnica son las siguientes: • Análisis y cuantificación de un número estadísticamente significativo de células (desde 1.000 a más de 100.000 células). • Múltiples marcajes de una sola célula. |
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